【摘 要】
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H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,2013年出现的H7N9流感病毒的6个内部基因全部来自于H9N2亚型禽流感病毒.加强对H9N2亚型禽流感病毒的监测意义重大,相关的高通量的快速检测方法研究迫在眉睫.电化学发光免疫检测方法(ElectroChemiluminescence Immunoassay,ECLIA)是集电化学发光、免疫分析、生物素-链霉亲和素系统和由固相免疫分析发展起来的磁微球等于一
【机 构】
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华南农业大学兽医学院;人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室,广州 510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛
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H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,2013年出现的H7N9流感病毒的6个内部基因全部来自于H9N2亚型禽流感病毒.加强对H9N2亚型禽流感病毒的监测意义重大,相关的高通量的快速检测方法研究迫在眉睫.电化学发光免疫检测方法(ElectroChemiluminescence Immunoassay,ECLIA)是集电化学发光、免疫分析、生物素-链霉亲和素系统和由固相免疫分析发展起来的磁微球等于一体的检测技术,是兼具化学发光的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性的新一代标记免疫检测技术.首先,用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用生物素标记其多克隆抗体；待测抗原或样品与钌标单抗作用1h后,再将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后再加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光的检测.并进行反应的敏感性、特异性、反应谱和重复性试验.用所建立的方法检测88份临床采集的鸡的咽肛棉拭子,并与鸡胚分离法进行比较.电化学发光免疫检测方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4-33.2；阴性和阳性变异系数分均小于10％；检测限为5×104EID50,能够特异性的检测H9亚型AIV,不与其他亚型AIV和其他类型的禽源病毒反应.3个小时内即可完成检测,与鸡胚分离法的符合率为86.4％.所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对该病的监测和防控提供重要的技术支持.
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MicroRNAs(miRNAs)are a class of small regulatory noncoding RNAs that modulate gene expression at the post-transcriptional level,playing a crucial role in cell differentiation and development.
自从上个世纪90年代H9N2亚型禽流感病毒在我国首次分离以来，因其传播效率高，波及面广，已造成畜禽养殖业重大的经济损失.病毒A/chicken/Shanghai/7/2001(SH/7)和A/chicken/shanghai/14/2001(SH/14)分离自同一个养殖场，基因序列高度同源，但气溶胶传播能力和热敏感性却截然相反.SH/7能够有效通过气溶胶传播的方式感染SPF鸡且对热敏感，而SH/1
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