【摘 要】
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目的 探讨低温刺激诱导心肌细胞损伤及凋亡,以及细胞外信号调节蛋白激酶5(ERK5)/凋亡调节蛋白Bim途径的调控作用。方法 基于乳鼠原代心肌细胞,低温培养箱施加低温刺激；使用特异性小干扰RNA(siRNA)下调ERK5或Biml的表达；细胞凋亡使用流式细胞仪检测；各蛋白表达水平通过western blot检测；细胞内钙离子、活性氧簇(ROS)水平、线粒体膜电位(△Ψm)通过荧光标记及流式细胞仪检测
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院心内科,上海市 200092 南昌大学第二附属医院心内科,南昌市 3
【出 处】
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2013中国医师协会中西医结合医师大会
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目的 探讨低温刺激诱导心肌细胞损伤及凋亡,以及细胞外信号调节蛋白激酶5(ERK5)/凋亡调节蛋白Bim途径的调控作用。方法 基于乳鼠原代心肌细胞,低温培养箱施加低温刺激；使用特异性小干扰RNA(siRNA)下调ERK5或Biml的表达；细胞凋亡使用流式细胞仪检测；各蛋白表达水平通过western blot检测；细胞内钙离子、活性氧簇(ROS)水平、线粒体膜电位(△Ψm)通过荧光标记及流式细胞仪检测。结果 在低温刺激下的心肌细胞中,ERK5 si RNA可-加剧Bim蛋白表达；Bim siRNA不影响ERK5,但减轻p-ERK5表达；ERK5 siRNA导致更高的细胞凋亡率,BimsiRNA则可减弱ERK5 siRNA的促凋亡作用；ERK5 siRNA加重了细胞内钙离子超载、ROS激活、线粒体膜电位破坏,BimsiRNA则可对抗上述损伤性作用。结论 在低温干预下的心肌细胞中,下调ERK5可释放对Bim的表达抑制,加重凋亡、细胞内钙离子超载、ROS爆发,造成更严重的线粒体膜电位破坏,而下调Bim则产生反向的保护作用。结果显示ERKS/Bim途径在低温诱导心肌细胞损伤中的重要调控作用。
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