论文部分内容阅读
目的：研究呼吸合胞病毒(RSV)感染小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)后，对Ⅰ型干扰素(IFN)和Ⅱ型IFN等诱导的JAK／STAT通路蛋白活化后核转移的影响。方法：从BALB／c小鼠的长骨中分离骨髓细胞，经过培养和刺激后得到BMDCs。将BMDCs接种于带小室的玻片上，以感染复数(multiplicity of infection，MOI)为1的RSV感染细胞，并设紫外线灭活的RSV(UV-RSV)和培养液(media)刺激为对照。在培养24小时后，分别用100 U／mL的IFN-β刺激30 min或0.64pmol／L的IFN-Y刺激45 min，然后进行免疫荧光染色。在荧光显微镜下计数STAT蛋白核转移阳性细胞的百分比，比较各组间的差异。结果：在未感染的BMDCs中，STAT1和STAT2蛋白主要存在与细胞浆中，当用IFN-β刺激BMDCs后可见到明显的STAT1和STAT2蛋白向细胞核转移，核转移阳性细胞百分比分别为89.0±4.6％和83.7±5.1％，与未处理组(NT组)相比有明显差异(p<0.01)。而RSV感染后，发现STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数较IFN_B刺激组明显减少(P<0.01)，说明RSV感染可以抑制IFN-β诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移而应用UV灭活的RSV感染后与IFN-β刺激组相比STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数却没有明显减少(P>0.05)。用IFN-Y刺激BMDCs后也可见到明显的STAT1蛋白向细胞核转移(阳性细胞为85.3±6．4％)，而RSV感染后与IFN-Y刺激组相比STAT1核转移阳性细胞数(79.3±4.9％)却未见明显减少(P>0.05)。结论：RSV感染BMDCs后，能特异性地抑制Ⅰ型IFN诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移，而对Ⅱ型IFN诱导的STAT1蛋白的核转移却没有影响。