C型产气荚膜梭菌贵州株肠毒素基因克隆与序列分析

• 作 者: 唐源[1]文明[2]罗阿东[1]鲍娟[1]周碧君[2]王开功[2]
• 机 构: 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳 550025
• 出 处: 第二届全国微生物实用技术生态环境应用学术研讨会
• 发表日期: 2009年期

采用用多重PCR方法对34株产气荚膜梭菌贵州分离株进行鉴定，获得1株肠毒素(CPE)阳性C型产气荚膜梭菌(CP2株)。参照国外发表的cpe全基因序列，设计合成一对特异性引物，采用PCR技术对CP2株进行扩增，将扩增产物连接到pMD18-T载体，并转化至大肠杆菌DH5a感受态细胞，提取质粒进行PCR和双酶切鉴定斤测序。结果显示，获得的基因序列全长960bp，编码319个氨基酸。同源性分析表明CP2与参考株的核苷酸同源性高达99.4％～99.8％，推导的氨基酸同源性为99.1％～99.7％。