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为了能够快速检测免疫球虫后宿主血清中特异性抗体的水平，原核表达并纯化EtMIC4-N蛋白，采用免疫印迹法确定其反应原性，并用其作为抗原致敏戊二醛醛化后的红细胞，以人工免疫柔嫩艾美耳球虫后分离的血清为阳性血清，以SPF鸡分离的血清为阴性血清，建立柔嫩艾美耳球虫间接血凝试验.结果显示：稀释度为1：2万鞣酸处理戊二醛醛化后的红细胞效果较好，而使用12.5μg/mL表达的重组蛋白EtMIC4-N即可以与阳性血清发生反应(可达1：1024)，与鸡的阴性血清及大肠杆菌病的阳性血清无反应，与堆型艾美耳球虫、巨型艾美尔球虫阳性血清有微弱反应(不超过1：8).试验证明该方法具有简单、方便、快捷、灵敏等优点.