葡萄卷叶伴随病毒3号外壳蛋白基因的原核表达和抗血清制备

• 作 者: 费菲;王克双;吕睦廸;李捷;程玉琴;
• 机 构: 中国农业大学农学与生物技术学院果树系/北京市果树逆境生理与分子生物学实验室,北京100193
• 出 处: 中国植物病理学会2011年学术年会
• 发表日期: 2011年期

　　利用特异性引物扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll-associated virus3,GLRaV-3)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21 (DE3)。用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,可表达出分子量约为40 kDa的蛋白。将纯化的表达产物免疫家兔制备抗血清。通过对田间葡萄植株样品的ELISA和Western blot检测,证实了所制备的抗血清与GLRaV-3具有良好的特异性反应。