【摘 要】
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将髓核细胞原位接种至水凝胶中,观察三维培养下髓核细胞的生物学行为。研究发现,葡聚糖/明胶水凝胶浓度的升高会降低其内部的细胞活性,进一步引起了髓核特异性基因的表达下降,不利
【机 构】
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400038 重庆,第三军医大学西南医院全军矫形外科中心,组织工程国家地方联合工程实验室,重庆市再生重建医学工程技术研究中心,重庆市组织工程实验室
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将髓核细胞原位接种至水凝胶中,观察三维培养下髓核细胞的生物学行为。研究发现,葡聚糖/明胶水凝胶浓度的升高会降低其内部的细胞活性,进一步引起了髓核特异性基因的表达下降,不利于新生胞外基质的形成,这与前面所发现的高浓度水凝胶的低孔径和孔隙率有着密切的关系。但是低浓度的水凝胶由于结构过于疏松,在培养7d后大量的组织碎片随着换液被弃去,导致了细胞的数量下降。这与细胞相容性检测中的所发现现象一致,说明低浓度的水凝胶松散的结构不利于构建组织工程髓核。各浓度中,10%浓度的水凝胶兼具了稳定的力学结构以及良好的细胞相容性,有利于内部细胞的增殖以及特异性基因的表达,促进胞外基质的合成。研究表明,较低浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶虽然具有较高孔径和孔隙率,但是其较差的力学性能和较快的降解速度限制了其应用,不适用于组织工程髓核的应用。而较高浓度的水凝胶,虽然细胞相容性相对较低,但是较高的交联密度和力学强度使得它具有稳定的力学结构,有利于内部细胞的长期培养,但是较低的孔径和孔隙率不利于内部细胞的营养供应和物质交换。另外,过离浓度的水凝胶可能会导致成胶速度过快,不利于水凝胶的注射,限制了在微创手术中的应用。所以选择一个适中的浓度,使水凝胶兼具有良好的细胞相容性和稳定的力学结构,对于水凝胶在组织工程应用是一项重要的任务。本研究中的葡聚糖/明胶复合水凝胶是一种三维、多孔的支架,选择适宜的浓度可使该水凝胶兼具良好的力学性能和细胞相容性,在髓核组织工程中具有应用前景,为其在椎间盘退变治疗中的临床应用奠定了基础。
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