【摘 要】
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背景 增殖诱导配体(APRIL)基因是肿瘤坏死因子家族的一员,具有促肿瘤细胞增殖作用.APRIL蛋白有膜结合型(全长)与可溶型(胞外区,sAPRIL)二种形式,具有相同的生物学活性.目前,大量研究聚焦于多发性骨髓瘤、霍奇金氏病等血液性疾病中APRIL及其受体的表达定位和功能等,而在实体肿瘤中研究相对较少,在肺癌与肠癌辅助诊断及治疗中的相关研究更是少之又少,我们课题组自2004年以来一直致力于该基因
【机 构】
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南通大学附属医院检验医学中心,南通市 226001 南通大学附属医院,南通市 226001
【出 处】
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中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会
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背景 增殖诱导配体(APRIL)基因是肿瘤坏死因子家族的一员,具有促肿瘤细胞增殖作用.APRIL蛋白有膜结合型(全长)与可溶型(胞外区,sAPRIL)二种形式,具有相同的生物学活性.目前,大量研究聚焦于多发性骨髓瘤、霍奇金氏病等血液性疾病中APRIL及其受体的表达定位和功能等,而在实体肿瘤中研究相对较少,在肺癌与肠癌辅助诊断及治疗中的相关研究更是少之又少,我们课题组自2004年以来一直致力于该基因在实体瘤中的基础与应用研究,现将本课题组的研究成果作一梳理,以期为肺癌、胰腺癌与肠癌等实体肿瘤的辅助诊断及基因治疗提供一定的理论基础.方法 利用基因重组技术克隆全长APRIL及sAPRIL研究APRIL基因的生物学功能；实时荧光定量PCR、Western印迹和免疫组织化学染色等技术检测APRIL在不同实体瘤中的组织分布特点；定量PCR、HE染色与ELISA法等检测痰液中APRIL及外周血中sAPRIL含量,辅助诊断肺癌与结直肠癌；构建APRIL siRNA慢病毒和质粒载体以及裸鼠移植瘤和原位诱导瘤模型,体内体外实验结合,探索胰腺癌与结直肠癌的基因治疗,Western印迹、流式细胞术、TUNEL和免疫组织化学等方法评价APRIL siRNA的基因治疗效果.结果 克隆的全长APRIL及sAPRIL能促进肿瘤细胞增殖,与调节肿瘤生长关系密切.APRIL基因在肝癌、胃癌、肺癌、食道癌、结肠癌、大肠癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌、胰腺癌和前列腺癌等实体瘤组织中高表达,其中结直肠癌中丰度最高,而正常组织几乎不表达.如图1所示,肺癌患者、良性肺部疾病患者及健康人群痰液标本APRIL mRNA阳性率分别为81.7％ (58/71)、3.2％ (2/62)和1.5％ (1/65).结直肠癌特别是肠腺癌患者血清中sAPRIL含量明显高于肠炎患者及健康对照组.APRIL siRNA慢病毒载体显著抑制胰腺癌细胞株CFPAC-1的增殖及胰腺癌裸鼠移植瘤模型的生长.APRIL siRNA质粒载体明显抑制结直肠癌细胞株SW480及结直肠癌裸鼠移植瘤模型的生长(如图2)与转移,引起肠癌细胞的凋亡与坏死.结论 APRIL基因有望成为实体肿瘤,如肺癌、胰腺癌与结直肠癌,新的血清学诊断标志物和分子治疗靶点.
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