【摘 要】
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应用流式细胞术检测杂色鲍血细胞.根据血细胞的前向角散射光和侧向角散射光的不同,可明显分为三个亚群：透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,组成比例分别为：32.71％,58.17％和8.55％.利用Annexin V-FITC/PI法检测血细胞凋亡率,结果显示血细胞在自然生理状态下的平均总凋亡率为3.76％.利用Mito Tracker Green作为线粒体特异性荧光探针,测得透明细胞、小颗粒细胞和大颗
【机 构】
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华南师范大学生命科学学院,广东省水产健康安全养殖重点实验室,生态与环境科学广东普通高校重点实验室,广州510631;华南师范大学体育科学学院,广州510631
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应用流式细胞术检测杂色鲍血细胞.根据血细胞的前向角散射光和侧向角散射光的不同,可明显分为三个亚群：透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,组成比例分别为：32.71％,58.17％和8.55％.利用Annexin V-FITC/PI法检测血细胞凋亡率,结果显示血细胞在自然生理状态下的平均总凋亡率为3.76％.利用Mito Tracker Green作为线粒体特异性荧光探针,测得透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞的Mito Tracker Green荧光强度分别为16.15,50.08和167.83；利用Lyso Tracker Red作为溶酶体的特异性荧光探针,三类血细胞的荧光强度分别为18.28,50.28和187.17,大颗粒细胞的线粒体和溶酶体数量远远多于其他两类细胞,而透明细胞最少.利用FDA测定非特异性酯酶活性,大颗粒细胞的非特异性酯酶活性最高,透明细胞最低.利用2,7-二氢二氯荧光黄双乙酸钠作为探针标记血细胞的活性氧,结果显示血细胞在自然生理状态下也含有一定量的ROS,其在两类颗粒细胞中高于透明细胞,在大颗粒细胞中最高.用黄绿色荧光微球作为被吞噬物测定血细胞的吞噬活性,结果显示血细胞的吞噬率为63.67％,表明该测定方法适用于杂色鲍血细胞的吞噬活性检测.本研究表明两类颗粒细胞可能在鲍类的免疫防御过程中发挥着更为重要的作用.
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