仿刺参肠道多糖的提取纯化及理化分析

来源 :第十二届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyp345
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  利用木瓜蛋白酶水解提取仿刺参肠道多糖,考查酶解时间、温度、加酶量对多糖得率的影响,通过单因素实验及正交实验优化酶解条件.采用三氯醋酸法除蛋白,醋酸钾沉淀多糖,凝胶柱层析分离得到纯化多糖A.使用葡聚糖凝胶(G-100)柱层析法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度检测,葡聚糖凝胶(G-200)柱层析测定相对分子质量,高效液相色谱法确定其单糖组分,并结合红外吸收光谱法与核磁共振对其结构进行初步检测.采用氯化钡-明胶比浊法测多糖中硫酸基含量.结果:酶解最佳条件为加酶量10400 U/g,酶解温度为55℃,酶解时间为6h,得率为8.11‰;纯化多糖A的相对分子质量和电荷都均一,相对分子质量约18.8×104 D,主要由氨基糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐和岩藻糖3种单糖组成,并含有少量的氨基葡萄糖、半乳糖,其中岩藻糖有α和β两种构型,以α-岩藻糖硫酸酯残基、β-岩藻糖硫酸酯残基形式存在.纯化多糖A硫酸基总含量约为9.59%,推测其属于硫酸软骨素类.
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