【摘 要】
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目的：验证小鼠损伤脊髓中高表达的microRNA-21 (miR-21)在neuro-2a细胞中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的作用,初步探讨miR-21在脊髓损伤过程的作用。方法：将neuro-2a细胞
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目的：验证小鼠损伤脊髓中高表达的microRNA-21 (miR-21)在neuro-2a细胞中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的作用,初步探讨miR-21在脊髓损伤过程的作用。方法：将neuro-2a细胞在体外培养16小时,分别按相应体系转染miR-21 mimics,继续培养48小时,提取6孔板内细胞总蛋白和总RNA行蛋白印记和实时定量PCR检测,利用HEK293细胞行荧光素酶报告基因检测。结果：neuro-2a细胞转染miR-21 mimics后,其内源性PDCD4的表达在蛋白和mRNA水平均明显降低。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21对PDCD4 3-UTR的预测位点有直接抑制作用,而将此位点突变后,miR-21对PDCD4 3-UTR预测位点的抑制作用消失。
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