【摘 要】
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目的:随着对肺癌发生、发展中分子生物学机制、诊断和预后以及肺癌中癌基因突变的深入研究,目前辅助EGFR靶向治疗的新型诊断方法已成为现阶段研究的热点,在此我们运用Real Time RT-PCR方法检测肺腺癌患者胸水,比较EGFR突变组与非突变组的自噬相关基因LC3和Beclin1的表达是否有差异,探索自噬活性与EGFR突变状态是否相关,为临床及实验研究提供新的思路和突破点.方法:收集河北医科大学第
【出 处】
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第九届中国肿瘤学术大会暨第十五届海峡两岸肿瘤学术大会
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目的:随着对肺癌发生、发展中分子生物学机制、诊断和预后以及肺癌中癌基因突变的深入研究,目前辅助EGFR靶向治疗的新型诊断方法已成为现阶段研究的热点,在此我们运用Real Time RT-PCR方法检测肺腺癌患者胸水,比较EGFR突变组与非突变组的自噬相关基因LC3和Beclin1的表达是否有差异,探索自噬活性与EGFR突变状态是否相关,为临床及实验研究提供新的思路和突破点.方法:收集河北医科大学第四医院癌检中心2015年9月至2015年12月初诊疑似肺癌患者胸水.苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色法)对患者胸水细胞涂片进行诊断筛查.免疫细胞化学法(Immunochemistry,ICC)进一步诊断细胞涂片上癌细胞的类型.ARMS(amplificationrefractory mutation system)实时定量荧光PCR法扩增癌细胞检测EGFR基因是否突变,进而把患者分为EGFR突变组与EGFR非突变组.Real Time RT-PCR方法检测胸水中癌细胞中自噬效应分子LC3和Beclin1的mRNA水平,运用统计学方法比较EGFR基因突变组与EGFR非突变组自噬效应分子LC3与Beclin1是否有差异性.结果:HE常规染色涂片分别经两位细胞病理学医生初诊,均可见丰富的恶性肿瘤细胞,细胞呈多形型,细胞核增大,染色质粗糙,核浆比增大,即可满足进一步免疫细胞化学染色与ARMS法检测的需要.免疫细胞化学染色法中,肺腺癌特异性标记抗体TTF-1及NapsinA等在细胞学涂片中都表现为阳性,即通过免疫细胞化学染色进一步诊断患者胸水属于肺腺癌.ARMS法检测恶性胸水共计40例,其中检测出EGFR非突变组15例,突变组25例.Real Time RT-PCR检测突变组与非突变组中的自噬相关蛋白LC3在统计学上有显著差异性,而Beclin1在统计学上无显著差异性.结论:肺腺癌胸水细胞在EGFR突变与非突变状态下的自噬活性有差异,非突变状态下自噬活性高于突变状态.
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