【摘 要】
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探讨染料木黄酮(Genistein)、正钒酸钠(Sodium orthovanadate,Na3Vo4)对椎间盘软骨终板软骨细胞的作用效应.方法:使用酶消化法培养大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞,将不同浓度Genistein(15、35及55 μmol/L)、Na3Vo4(10、20及30 μmol/L)加入培养的底3代软骨细胞中,培养7d,MTT检测软骨细胞增殖率,RT-PCR检测Ⅱ型、Ⅸ型胶原和Ag
【机 构】
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上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院上海,200032
【出 处】
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第六届上海国际针灸临床与科研学术研讨会
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探讨染料木黄酮(Genistein)、正钒酸钠(Sodium orthovanadate,Na3Vo4)对椎间盘软骨终板软骨细胞的作用效应.方法:使用酶消化法培养大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞,将不同浓度Genistein(15、35及55 μmol/L)、Na3Vo4(10、20及30 μmol/L)加入培养的底3代软骨细胞中,培养7d,MTT检测软骨细胞增殖率,RT-PCR检测Ⅱ型、Ⅸ型胶原和Aggrecan mRNA的表达,定量RT-PCR检测IGFR、PTPnl、PTPnl、IGFR mRNA的表达.结果:干预7d后,15 μmol/L Genistein组各项指标与模型组比较变化不明显(P＞0.05);35 μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、Ⅱ型胶原及aggrecan mRNA表达显著降低(P＜0.01),IGFR mRNA表达较模型组有所降低,但无显著性差异(P＞0.05);55μmol/L Genistein组与模型组比较,.软骨细胞增殖率、aggrecan基因表达显著下降(P＜0.01),Ⅸ型胶原、IGFR mRNA表达较模型组有所降低(P＜0.05);各浓度Genistein组PTPnl mRNA表达无显著变化.与模型组比较,10 μmol/L Na3Vo4组各项检测指标变化不明显,30 μmol/L Na3Vo4组Ⅱ、Ⅸ型胶原mRNA表达明显降低(P＜0.01),20及30μmol/L Na3Vo4组软骨细胞增殖率明显下降(P＜0.01),Aggrecan以及PTPnlmRNA表达显著降低(P＜0.05),IGFR mRNA表达无显著变化(P＞0.05).结论:适当剂量Genistein、Na3Vo4在椎间盘软骨终板软骨细胞增殖、胶原表达以及aggrecan表达等方面起重要作用,Genistein可特异性抑制PTKs中IGFR基因表达,适当剂量Na3Vo4可抑制PTPs中PTPnl的基因表达,降低软骨细胞生物学功能.
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