【摘 要】
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为更准确对猪肺炎支原体(Mhp)感染及免疫状况进行检测,本文以猪鼻拭子为检测样品,利用猪肺炎支原体粘附因子P97R1原核表达蛋白作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP
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为更准确对猪肺炎支原体(Mhp)感染及免疫状况进行检测,本文以猪鼻拭子为检测样品,利用猪肺炎支原体粘附因子P97R1原核表达蛋白作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗,建立Mhp sIgA间接ELISA检测方法(SIgA-ELISA)。通过对包被抗原的浓度,样品的孵育时间,封闭液,二抗与三抗的最佳稀释度和作用时间以及显色液的作用时间进行优化,摸索该方法的最佳反应条件。根据对260份Mhp SIgA阴阳性标准品的检测结果,利用Medcalcl软件确定了SIgA-ELISA检测方法的cut-off值。并将该方法与Mhp套式PCR检测方法以及商品化的Mhp抗体ELISA检测试剂盒(IgG-ELISA)进行平行比较,结果发现SIgA-ELISA方法对Mhp感染检测具有很高的敏感性(97.0%)、特异性(94.4%)与准确性(95.8%);且SIgA-ELISA方法与IgG-ELISA方法相比,能有效区分Mhp的感染与免疫。
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