【摘 要】
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背景:结核病新型疫苗的研制对该病的有效防控至关重要.亚单位蛋白疫苗因为组成成份明确,具有良好的安全性,最受重视.机体抗结核分枝杆菌的感染主要依靠Th1型细胞免疫应答,因此,发展有效的结核病亚单位蛋白疫苗,必须要依赖能刺激Th1型细胞免疫反应的佐剂.但是,国内、外尚无适宜的佐剂.前期,我们已建立一种Th1型细胞免疫反应的佐剂MTO(Wang X,etal.Plos One,2015),本研究拟进一步
【机 构】
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华中科技大学同济医学院病原生物学系,武汉,430030
【出 处】
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21世纪第五届全国人兽共患病学术研讨会
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背景:结核病新型疫苗的研制对该病的有效防控至关重要.亚单位蛋白疫苗因为组成成份明确,具有良好的安全性,最受重视.机体抗结核分枝杆菌的感染主要依靠Th1型细胞免疫应答,因此,发展有效的结核病亚单位蛋白疫苗,必须要依赖能刺激Th1型细胞免疫反应的佐剂.但是,国内、外尚无适宜的佐剂.前期,我们已建立一种Th1型细胞免疫反应的佐剂MTO(Wang X,etal.Plos One,2015),本研究拟进一步改善其刺激机体免疫应答的强度和类型.方法:首先,利用基因工程技术制备了结核分枝杆菌抗原CMFO;三种类型的佐剂包括两种油包水形式的MTO和MTMO以及一种脂质体形式佐剂DM被制备;100μl的佐剂与20μg CMFO抗原(溶于100μl的10 mM Tris-buffer)形成不同类型的候选疫苗:CMFO/MTO、CMFO/MTMO和CMFO/DM.上述剂量分别皮下免疫C57BL/6雌性小鼠(6-8周龄)两次,间隔三周.卡介苗(10 6 CFU)皮下免疫一次作为阳性对照,单独佐剂或PBS处理作为阴性对照.免疫完成后三周,各组小鼠经呼吸道感染60 CFU的结核分枝杆菌H37Rv毒株,感染四周后,肺脏和脾脏细菌计数和肺脏病理学,用于评价抗感染保护性.ELISA检测免疫小鼠血清CMFO抗原特异性的IgG1、IgG2a和IgG;ELISA分析脾细胞分泌CMFO抗原特异性的IL-2、TNF-α和IFN-γ的水平;流式细胞仪分析脾细胞中CMFO特异的多功能T细胞数量.
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