【摘 要】
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目的：建立RNA恒温扩增技术快速鉴定鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌(RIARD-MAC)的方法,评估鉴定分枝杆菌临床分离株的应用效果。方法：以鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的16S rRNA的特异序列为检测靶标设计各自的RNA探针和通用的带有T7启动子的逆转录扩增引物,42℃恒温扩增实时检测,分别在鸟分枝杆菌检测管和胞内分枝杆菌检测管中对21种分枝杆菌标准株、5株非分枝杆菌和259株分枝杆菌临床分离株进行鉴别
【机 构】
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同济大学附属上海市肺科医院/上海市结核(肺)重点实验室 上海 200433 苏州大学基础医学与生物
【出 处】
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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：建立RNA恒温扩增技术快速鉴定鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌(RIARD-MAC)的方法,评估鉴定分枝杆菌临床分离株的应用效果。方法：以鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的16S rRNA的特异序列为检测靶标设计各自的RNA探针和通用的带有T7启动子的逆转录扩增引物,42℃恒温扩增实时检测,分别在鸟分枝杆菌检测管和胞内分枝杆菌检测管中对21种分枝杆菌标准株、5株非分枝杆菌和259株分枝杆菌临床分离株进行鉴别检测；同时以PCR测序结果为参考对照。结果：RIARD-MAC可以在2h内完成检测,可分别准确鉴定出21种分枝杆菌标准株及5株非分枝杆菌中的鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌,鸟分枝杆菌检测灵敏度达40CFU/反应,胞内分枝杆菌检测灵敏度可达400CFU/反应；检测分枝杆菌临床分离株中鸟分枝杆菌的灵敏度、特异度均为100％(8/8)、100％ (251/251)；胞内分枝杆菌的灵敏度、特异度均为100％ (82/82)、100％ (177/177)。结论：RIARD-MAC鉴定鸟分枝杆菌具有较高的灵敏度、特异度,检测快速,有望成为一种新的鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌临床分离株鉴定方法。
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