【摘 要】
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目的 已有研究证实,脂肪干细胞(ADSCs)能诱导分化为神经元样细胞.本文试图通过化学诱导和生长因子分步诱导两种不同的方法,来比较ADSCs向神经元样细胞分化效率及其稳定性.方法 利用流式细胞技术对ADSCs进行表型鉴定.将实验分为化学诱导组(DMEM/F 12+2%DMSO+200μmol/LBHA)和生长因子分步诱导组(第一步:DMEM/F 12+2% B27+20ng/mL EGF+20ng
【机 构】
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天津医科大学总医院,天津 300052 武警后勤学院附属医院 天津 300162
【出 处】
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2014全国神经损伤大会暨第三届天坛全国神经创伤学术研讨会
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目的 已有研究证实,脂肪干细胞(ADSCs)能诱导分化为神经元样细胞.本文试图通过化学诱导和生长因子分步诱导两种不同的方法,来比较ADSCs向神经元样细胞分化效率及其稳定性.方法 利用流式细胞技术对ADSCs进行表型鉴定.将实验分为化学诱导组(DMEM/F 12+2%DMSO+200μmol/LBHA)和生长因子分步诱导组(第一步:DMEM/F 12+2% B27+20ng/mL EGF+20ng/mL bFGF,第二步:DMEM/F 12+BDNF +NGF+RA).免疫荧光法检测分化后细胞标记物Nestin、Neun、MAP2和GFAP的表达情况.此外,用MTT法检测细胞活力和增殖情况.结果 免疫荧光结果分析表明,以上两组诱导后的ADSCs都不同程度地表达了神经元特异性标志物Nestin、Neun、MAP2和GFAP.化学诱导组早期MAP2和Neun表达率很高,但随着时间的推移,其神经样形态是可逆的,且诱导后的神经元样细胞很快就会死亡.而生长因子诱导组诱导1周发现有Nestin的表达,3周后MAP2、Neun和GFAP表达逐渐增加.结论 对比分析表明,化学诱导ADSCs向神经元样细胞分化速度较快,但诱导后的神经元样细胞不够稳定,只能短时间存在;而生长因子分步诱导法则比较稳定.
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