银染mRNA差异显示方法在致突变实验中的初步应用

• 作 者: 吴永魁;李乾学;张锦霞;张立树;栾新红;
• 机 构: 解放军军需大学军事兽医研究所 吉林 长春 130062
• 出 处: 中国畜牧兽医学会兽医药理学毒理学分会中国毒理学分会兽医毒理学专业委员会联合学术会议
• 发表日期: 2003年期

目的:建立在药物致突变研究中应用银染mRNA差异显示的方法。
方法：提取未经过/经过环磷酰胺处理的Balb/c小鼠肝组织的总RNA并以此为模板，采用dT12CG、dT12AG、dT12GG为锚定引物，通过反转录、差异显示PCR反应，经6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带，回收后将其再扩增。
结果：RNA投入量为3μg、镁离子浓度为1.5～2.0mmol/L、退火温度为40℃时，扩增的片段条带清晰、背景低,差异条带明显：再扩增条带单一。
结论：银染mRNA差异显示技术可成功应用于药物致突变的研究。