TaqMan-MGB实时荧光定量PCR检测RIG-G基因方法的建立及其方法学验证

来源 :第五届东方检验医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:supergirl4
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  目的:建立一种以TaqMan-MGB荧光探针为特点,检测人类急性早幼粒细胞白血病(M3型)中维甲酸诱导基因G(RIG-G)的实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法,并运用该方法对正常人、M3患者外周血中的RIG-G表达水平进行分析,探讨其在M3诊断中的价值。方法:方法学建立。针对人RIG-G基因设计特异性引物和TaqMan-MGB荧光探针,以逆转录的cDNA为模板,建立TaqMan-MGB实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线;在方法特异性、正确度、精密度、分析灵敏度、干扰物质等各方面对检测方法的性能进行评估,并用该法验证20例M3患者外周血与骨髓中RIG-G表达水平相关性,同时检测40份正常人及20份M3患者标本,t检验比较两组外周血RIG-G水平,用ROC曲线分析其对M3的检测效能。
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