【摘 要】
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[目的]筛选对甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hübner)具有高杀虫毒力的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并对其包含的cry基因类型、表达产物进行鉴定分析.[方法
【机 构】
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河北农业大学植物保护学院,河北保定071000
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[目的]筛选对甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hübner)具有高杀虫毒力的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并对其包含的cry基因类型、表达产物进行鉴定分析.[方法]利用饲料表面覆盖法测定Bt菌株杀虫活性,利用SPSS软件计算LC50值,比较LC50值筛选对甜菜夜蛾高杀虫毒力Bt菌株,利用PCR-RFLP结合测序方法鉴定Bt菌株所含cry基因类型,油镜(100×)下观察Bt菌株晶体形态,SDS-PAGE分析Bt菌株表达产物.[结果]从本实验室已分离保存的Bt菌株中筛选出了10株对甜菜夜蛾具有较高杀虫毒力的菌株,该10株Bt菌株对甜菜夜蛾初孵幼虫的LC50值为0.556～2.984 mg/mL胞晶混合物；该10株Bt菌株的晶体主要是大菱形、小菱形、球形、不规则形等几种形态；15株Bt菌株中,6株含有cry1Aa、crylAb、cry1L等cry1类基因,3株含有cry1Ⅰ类基因,9株含有cry2Ab、cry2Ad、cry2Ah等cry2类基因,3株含有cry7A类基因,1株含有cry9B类基因；这些菌株主要表达约130～150kDa的Cry1类蛋白和约60 kDa的Cry2类蛋白,部分菌株还表达较弱的约80 kDa蛋白.[结论]筛选得到10株对甜菜夜蛾具有较高杀虫毒力的Bt菌株,并对其包含的cry基因类型及表达产物进行了鉴定分析,为甜菜夜蛾的生物防治及环境友好型生物药剂的开发提供了新的菌株及基因资源.
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