【摘 要】
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本研究根据NCBI上已报道的洋桔梗FT基因的cDNA序列设计引物，并引入合适的酶切位点，从洋桔梗德拉迷斯cDNA中克隆得到541bp的ORF序列和394bp的干涉片段.通过酶切连接技术，将Eg
【机 构】
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华中农业大学教育部园艺植物生物学重点实验室,华中农业大学园艺林学学院,武汉430070
【出 处】
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中国园艺学会观赏园艺专业委员会2013年学术年会
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本研究根据NCBI上已报道的洋桔梗FT基因的cDNA序列设计引物，并引入合适的酶切位点，从洋桔梗德拉迷斯cDNA中克隆得到541bp的ORF序列和394bp的干涉片段.通过酶切连接技术，将EgFT基因的ORF序列正向插入到中间表达载体pCAMBIA2300s中，获得了含有CaMV 35S启动子和卡那霉素抗性基因的正义表达载体pC2300s-EgFT；通过同源重组法(BP反应)，将EgFT基因的片段整合进入载体pHellsgate2中，形成含有intron的反向重复序列，获得了含有CaMV 35S启动子、卡那霉素和壮观霉素抗性基因的干涉表达载体pHellsgate2-EgFT.通过RT-PCR分析，发现EgFT基因在花芽中的表达量最高，其次是成熟叶片、幼叶和茎，在萼片和花瓣中有微弱的表达，雄蕊和雌蕊中表达量极低或不表达.
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