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边界基因在植物器官边界的形成和确立过程中起重要调控作用.PTL转录因子在植物花器官边界维持及植物生长中发挥着重要的的作用.本研究以白菜为试料,采用同源克隆技术,对白菜BrcPTL基因序列序列进行了克隆,并对其生物信息学进行分析.采用荧光定量PCR方法,研究BrcPTL在白菜中的表达模式.进一步构建了白菜BrcPTL基因的过表达载体和干扰载体.结果显示:1)PTL基因的gDNA长度2973bp,含有2个外显子和1个内含子.该基因cDNA片段长度为1833bp,包含ORF为1716bp,编码571个氨基酸,且含有GT-2因子特有的两个Trihelix保守结构域,其氨基酸序列与其它物种已知的GT-2亚家族基因序列具有76.00％～19.45％的相似性.2) BrcPTL在白菜根、茎、叶、花等检测器官组织中均有表达,其中在白菜根和花序中高表达,说明BrcPTL与花形成密切相关.3)利用XbaⅠ,PstⅠ限制性内切酶分别对重组载体pMD-18T-BrcPTL和超表达载体pCAMBIA2301进行双酶切,得到BrcPTL cDNA编码区序列片段和线性pCAMBIA2301质粒,在T4-DNA连接酶的作用下,BrcPTL基因与线性pCAMBIA2301定向连接.用双酶切和测序鉴定,证明成功构建BrcPTL基因超表达载体pCAMBIA2301-BrcPTL.4)按照OZ-LIC (one-step,zero-background ligation-independent cloning,OZ-LIC)法设计两对连接有LIC接头的扩增引物,扩增BrcPTL基因特异片段,分别获得长度为428bp和460bp片段,以正反两个方向分别插入到pRNAi-LIC载体中相应位置,用菌落PCR和双酶切鉴定,证明成功构建BrcPTL基因的RNAi载体pRNAi-LIC-BrcPTL.