【摘 要】
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目的 探讨17β-雌二醇(17β-E2)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、成肌分化的影响,以提高BMSCs成骨骼肌分化效率,为压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的注射疗法提供足量细胞,同时在细胞水平上探索雌激素治疗SUI的作用机理,为临床用药提供理论依据.方法 利用贴壁法体外分离、
【机 构】
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暨南大学附属第一医院妇产科 南京医科大学附属南京第一医院妇产科
【出 处】
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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会
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目的 探讨17β-雌二醇(17β-E2)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、成肌分化的影响,以提高BMSCs成骨骼肌分化效率,为压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的注射疗法提供足量细胞,同时在细胞水平上探索雌激素治疗SUI的作用机理,为临床用药提供理论依据.方法 利用贴壁法体外分离、纯化BMSCs,连续传代3次后,所有细胞用于以下实验：MTT法检测在0～1nmo儿浓度范围内17β-E2对BMSCs增殖活性的影响,以确定最佳的作用剂量,Hoechst33258染色测定最佳作用剂量的17β-E2诱导后BMSCsDNA含量变化,以观察其对BMSCs增殖的影响,同时以不含17β-E2的完全培养基培养的细胞为对照组；以10μmol/L5-氮杂胞苷(5-aza)诱导BMSCs成肌分化,免疫荧光法检测添加不同浓度17β-E2诱导培养后BMSCs中骨骼肌分化标志肌球蛋白重链(MHC)、myogenin、desmin表达情况,利用TUNEL法检测5-aza诱导BMSCs的凋亡率及添加17β-E2后对药物诱导细胞凋亡的影响.结果 17β-E2可增强BMSCs增殖活性,且呈浓度依赖关系,最佳促增殖浓度为1nmol/L；1nmol/L17β-E2诱导组与对照组BMSCsDNA含量随培养时间延长均呈增加趋势,培养48h后两组差异无统计学意义,7d、14d时两组细胞内DNA含量差异有统计学意义.17β-E2可增加BMSCs骨骼肌分化标志物表达,差异有统计学意义,P＜0.05.5-aza可诱导BMSCs凋亡,TUNEL阳性细胞率呈时间依赖性增加,17β-E2可降低TUNEL阳性细胞率,差异有统计学意义,P＜0.05.结论 17β-E2对BMSCs的增殖具有促进作用,且能增强5-aza诱导骨骼肌分化效率,降低药物诱导引起的细胞凋亡.
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