【摘 要】
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目的：探讨体外过表达IL-18 基因调节舌癌细胞活性,诱导舌癌细胞凋亡的潜在分子机制.方法：我们首先构建了真核质粒载体pcDNA3.1-IL18,转染舌癌细胞系CRL-1623TM,通过实时定
【机 构】
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吉林大学口腔医院颌面外科 吉林长春 130021
【出 处】
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2014年口腔颌面-头颈肿瘤学术研讨会暨颅底多学科学术沙龙会议
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目的：探讨体外过表达IL-18 基因调节舌癌细胞活性,诱导舌癌细胞凋亡的潜在分子机制.方法：我们首先构建了真核质粒载体pcDNA3.1-IL18,转染舌癌细胞系CRL-1623TM,通过实时定量(qRT-PCR)、western blot 和免疫荧光技术检测IL-18 的表达；然后,应用MTT、流式细胞术(FCM)、Annexin-V/PI 和吉姆萨染色(Giemsa)方法测定IL-18 对舌癌细胞活性的影响；我们又用western blot、qRT-PCR 及caspase 活性试剂盒等方法检测凋亡相关基因, 如caspase3/7/9, cytC, IFN-γ,cyclinA1/D1 的表达； 最后, 通过western blot 检测GSK-3β(glycogen synthase kinase-3β)、p-GSK-3β(phosphorylation-GSK23β)的表达,并用GSK-3β抑制剂Kp(kenpaullone)处理细胞,检测细胞活性.
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