【摘 要】
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贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程.本文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克
【机 构】
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首都医科大学中医药学院,北京100069
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贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程.本文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;使用实时定量PCR(qRT-PCR)研究基因的诱导表达水平.克隆得到TwKAO长度为1874bp,编码487个氨基酸,蛋白相对分子量56.02kD,理论等电点8.89;经茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,TwKAO基因相对表达量在12小时达到峰值;经植株组织表达分析证实,TwKAO基因在雷公藤的叶中表达量最高,根中最低.本研究首次克隆得到雷公藤KAO基因,并分析其mRNA表达特征,为深入研究雷公藤生长发育以及萜类活性成分次生代谢研究奠定基础.
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