【摘 要】
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目的：探讨BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养及复合自体"双相"骨基质明胶(BMG)修复关节软骨缺损的可行性.方法：1、贴壁离心法分离兔BMSCs,酶消化法结合组织块法获取肋软骨细
【机 构】
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中南大学湘雅医学院附属海口医院骨科中心
【出 处】
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第一届全国脊柱脊髓损伤治疗与康复技术研讨会暨2014年海南省医学会骨科学术年会
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目的：探讨BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养及复合自体"双相"骨基质明胶(BMG)修复关节软骨缺损的可行性.方法：1、贴壁离心法分离兔BMSCs,酶消化法结合组织块法获取肋软骨细胞,体外扩增,形态学观察,绘制生长曲线、检测BMSCs的表型,组织学鉴定软骨细胞.2、取两种细胞的P2代随机分为三组：A为共培养组,B为高浓度单纯软骨细胞组,C为低浓度单纯软骨细胞组,体外培养2周后比较各组培养液中GAG含量的差异.3、改良的Urist法制备兔自体"双相"BMG支架,体外与共培养细胞复合培养3天行电镜观察.4、制备36只实验兔膝关节软骨缺损模型,随机分为三组：实验组植入共培养细胞-BMG复合体,对照组植入单纯支架,空白组不作特殊处理.术后1、2、3个月取材行大体、组织学观察并评分行统计学分析.结果：1、贴壁离心法分离的BMSCs生长良好,酶消化法结合组织块法获得的肋软骨细胞生物活性良好.2、2周后A组培养液的GAG含量明显多于B、C组,差异有统计学意义(P＜0.05).3、扫描电镜示BMG呈多孔隙网络状结构,细胞黏附其表面,状态良好.4、术后3个月实验组软骨缺损由透明软骨基本修复,对照组和空白组软骨缺损由纤维组织部分修复.实验组在各时期的评分与对照组及空白组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),表明其修复效果优于其它两组.结论：BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养,可被诱导分化为软骨细胞,未出现明显排斥反应,减少了软骨细胞的用量；自体"双相"BMG是较理想的支架材料；共培养细胞与自体"双相"BMG复合可有效地将关节软骨缺损修复.
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