【摘 要】
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目的：研究甘草素(liquirigenin,LQ)增强顺铂(CDDP)抑制黑色素瘤B16F10侵袭转移的作用.方法：采用四甲偶氮唑盐(MTT)比色法观察不同剂量LQ与CDDP联合作用对B16F10细胞生长能力的影响;采用划痕实验检测其对细胞迁移的影响;Transwell小室实验进行细胞侵袭能力的检测;蛋白质印迹法分析侵袭转移相关蛋白和通路的影响.同时,为了进一步证实体外实验,建立实验性肺转移模型,
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院,营养与食品卫生系
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目的：研究甘草素(liquirigenin,LQ)增强顺铂(CDDP)抑制黑色素瘤B16F10侵袭转移的作用.
方法：采用四甲偶氮唑盐(MTT)比色法观察不同剂量LQ与CDDP联合作用对B16F10细胞生长能力的影响;采用划痕实验检测其对细胞迁移的影响;Transwell小室实验进行细胞侵袭能力的检测;蛋白质印迹法分析侵袭转移相关蛋白和通路的影响.同时,为了进一步证实体外实验,建立实验性肺转移模型,随机将C57BL/6小鼠分为空白对照组,阴性对照组,顺铂对照组(低、高剂量);联合实验组(低、中、高剂量LQ分别与低剂量CDDP联合),21天加药处理后处死,称重,取肺,拍照,计算肺指数;应用ELISA方法检测MMP-2/9表达水平.
结果：1、与单独低剂量CDDP组相比,不同剂量的LQ联合CDDP均能够明显抑制B16F10细胞生长,其差异具有统计学意义(p＜0.05).2、中、高剂量LQ联合CDDP组明显降低了细胞迁移率与穿透基底膜的能力(p＜0.01),并且高剂量LQ联合CDDP组的细胞侵袭转移能力明显低于单独高剂量CDDP组,差异具有统计学意义(p＜0.05).3、中、高剂量LQ联合CDDP组细胞MMP-2和MMP-9蛋白水平较单独低剂量CDDP组明显降低.4、与单独高剂量CDDP组相比,高剂量组LQ联合CDDP组PI3K,p-AKT蛋白表达,明显下调,而PTEN蛋白表达则呈现显著上升(p＜0.05).5、动物实验与细胞实验结果一致,中、高剂量LQ联合CDDP组能明显降低接种B16F10黑色素瘤细胞小鼠的肺重和肺转移数量,显著减少血清中MMP-2/9含量,与低剂量CDDP组相比,差异具有统计学意义(p＜0.05).
结论：LQ可增强CDDP抑制黑色素瘤B16F10细胞的侵袭转移作用,其机制可能通过调控PI3K/PTEN/AKT信号通路,下调MMP-2和MMP-9的蛋白表达,从而抑制细胞侵袭转移.
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