【摘 要】
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根据Sundick等发表的鸡IL-2基因(chIL2)序列设计合成特异性引物,用RT-PCR从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞扩增出450bp的目的片段,酶切鉴定及序列测定结果表明为鸡IL-2基因.该基因包括鸡IL-2基因的全部开放阅读框,编码142个氨基酸组成的蛋白质,与GeneBank上已知的鸡IL-2基因相比,在编码氨基酸的49位有一个氨基酸的缺失,除此之外,与Broiler、SC、Chenren
【机 构】
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辽宁益康生物制品有限公司,辽宁,辽阳,111000 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,13
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会
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根据Sundick等发表的鸡IL-2基因(chIL2)序列设计合成特异性引物,用RT-PCR从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞扩增出450bp的目的片段,酶切鉴定及序列测定结果表明为鸡IL-2基因.该基因包括鸡IL-2基因的全部开放阅读框,编码142个氨基酸组成的蛋白质,与GeneBank上已知的鸡IL-2基因相比,在编码氨基酸的49位有一个氨基酸的缺失,除此之外,与Broiler、SC、Chenren和Xiaoshan鸡在编码氨基酸上完全一致,具有较近的亲缘关系;与Kestrel来航鸡、来航SPF鸡、Obese、Silky和Xianju鸡等有1～4个氨基酸的差异;而与火鸡和鹌鹑的氨基酸同源性分别为69.9﹪和59.4﹪.将克隆到的基因插入到融合蛋白原核表达载体pGEX-6p-1中,得到重组表达质粒pGEX-IL2.将此重组质粒转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导,表达出了大小约为40kD的GST-chIL2融合蛋白,其中GST部分为26kD,鸡IL-2为14kD,与预期的鸡IL-2成熟蛋白大小一致.
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