正交设计方法优化连翘ISSR-PCR反应体系

• 作 者: 汤正辉 祝亚军 谭运德 谭晓风
• 机 构: 中南林业科技大学,湖南长沙410004;河南省林业科学研究院,河南郑州450008河南省林业科学研究院,河南郑州450008中南林业科技大学,湖南长沙410004
• 出 处: 中国林学会经济林分会2012年学术年会
• 发表日期: 2012年11期
• 关键词: 连翘 正交设计 ISSR-PCR

　　通过正交设计的方法优化连翘ISSR—PCR反应体系,PCR 结果用MINITAB 16数据处理软件分析,确立了适用于连翘的ISSR反应体系和扩增条件.结果表明：最适反应体系(25 μL)为,含1.2U Taq DNA聚合酶、1.5 m mol·L-1 Mg2+、20～80 ng 模版DNA、0.3 mmol·L-1 dNTPs、0.3 μ mol·L-1 引物.对连翘ISSR—PCR 最适反应体系进行了梯度退火试验,得到最佳退火温度为55℃.