【摘 要】
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目的：探讨骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的潜能,探索牙髓再生修复的干细胞源,研究Wnt信号通路在其分化中的调控作用。方法：本实验利用牙胚条件培养液诱导骨髓间充
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目的：探讨骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的潜能,探索牙髓再生修复的干细胞源,研究Wnt信号通路在其分化中的调控作用。方法：本实验利用牙胚条件培养液诱导骨髓间充质干细胞向牙本质样细胞分化,诱导7天时RT-PCR检测到成牙本质细胞标志物DSPP、DMP-1表达；在此诱导条件下,培养液内分别加入外源性Wnt激活剂Wnt3a/抑制剂DKK-1,检测经典Wnt通路中β-catenin、LEF1、TCF4表达变化,以及DSPP、DMP-1表达的变化,以探讨经典Wnt通路参与骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化中的调控作用。结果：牙胚条件培养液诱导7天,骨髓间充质干细胞表达DSPP、DMP-1阳性,表明在牙胚条件培养液诱导下骨髓间充质干细胞可分化为成牙本质样细胞；外源性Wnt激活剂Wnt3a/抑制剂DKK-1分别加入特定培养液内,骨髓间充质干细胞胞质内β-catenin水平明显上升/下降,Wnt信号通路中β-catenin下游核内转录因子Lef1、Tcf4基因表达水平明显上升/下降,而DSPP、DMP-1的表达呈明显降低/升高。结论：本实验证实牙胚条件培养液这一微环境的作用下骨髓间充质干细胞可以向成牙本质样细胞分化。外源性的Wnt3a/DKK-1可改变骨髓间充质干细胞的经典Wnt信号通路活化水平,参与调节骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化过程,经典Wnt信号通路抑制剂可促进骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞的分化。
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