【摘 要】
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根据Z26520中fedF序列设计1对引物,从发病仔猪的腹泻粪便分离获得的大肠杆菌中扩增得到fedF基因,经纯化、连接、转化,将其克隆到pMD18-T中,所克隆fedF基因序列与GenBank中收
【机 构】
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湖南农业大学动物医学院,长沙,湖南,410128
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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根据Z26520中fedF序列设计1对引物,从发病仔猪的腹泻粪便分离获得的大肠杆菌中扩增得到fedF基因,经纯化、连接、转化,将其克隆到pMD18-T中,所克隆fedF基因序列与GenBank中收录的其他fedF基因序列的同源性在97.8％～99.2％。另设计1对引物,利用基因工程方法将所克隆的fedF的编码序列亚克隆到表达载体pBV220中,转化大肠杆菌BL21(DE3)LysS获得表达重组菌。SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析表明重组菌在诱导后可以表达特异性的FedF蛋白,该重组蛋白分子量约为30kDa.该重组蛋白的表达量占菌体总蛋白量的11.17％。将纯化的重组FedF蛋白免疫小鼠,攻毒试验表明免疫小鼠可完全抵抗致死性的E.coli的感染。
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