应用SMART技术构建红麻叶片全长cDNA文库

来源 :中国作物学会2012年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：say_8139

【摘要】

：

　　以红麻福红992为材料,利用SMART技术构建了红麻叶片全长cDM文库.红麻叶片总RNA后,用总RNA反转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成足量的双链cDNA,经过蛋白酶K消化及cDNA大

【作者】

：

王典祁建民

【机构】

：

福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室

【出处】

：

中国作物学会2012年学术年会

【发表日期】

：

2012年期

【关键词】

：

SMART技术构建红麻叶片全 cDNA文库插入片段反转录合成扩增

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　　以红麻福红992为材料,利用SMART技术构建了红麻叶片全长cDM文库.红麻叶片总RNA后,用总RNA反转录合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成足量的双链cDNA,经过蛋白酶K消化及cDNA大小片段分级分离后与载体链接并转化入大肠杆菌DH5a中.结果表明所构建的红麻叶片cDNA文库的重组率为100％,插入片段长度在500bp-2000bp之间,平均插入片段长度为700bp.通过计算得出未扩增文库的库容为1.34×107 (pfu/ml),扩增后的文库库容为1.08×109 (pfu/ml).

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