【摘 要】
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H5N1亚型禽流感病毒(AIV)已经在16个国家和地区引起超过800人的感染病例,死亡率达53％.高致病性禽流感病毒的跨种间传播和重组,并导致动物发病或死亡是当前研究的热点.其中H5N1 AIV的非结构蛋白NS1是影响病毒毒力的重要决定因子之一.本研究团队前期临床分离的两株猪源H5N1亚型AIV具有高度同源的遗传背景,但对SPF鸡的致病表型却完全不同,前期研究结果表明,NS1效应区的5个氨基酸自然
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州730046 武汉大学生命科学
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
论文部分内容阅读
H5N1亚型禽流感病毒(AIV)已经在16个国家和地区引起超过800人的感染病例,死亡率达53％.高致病性禽流感病毒的跨种间传播和重组,并导致动物发病或死亡是当前研究的热点.其中H5N1 AIV的非结构蛋白NS1是影响病毒毒力的重要决定因子之一.本研究团队前期临床分离的两株猪源H5N1亚型AIV具有高度同源的遗传背景,但对SPF鸡的致病表型却完全不同,前期研究结果表明,NS1效应区的5个氨基酸自然缺失导致其抑制Ⅰ型干扰素(IFN)产生的能力不同,并影响两株病毒在SPF鸡体内的复制水平(Zhu etal,J Virol,2008).本研究拟深入研究此5个氨基酸的自然缺失在哺乳动物或细胞中调控IFN产生的分子机制.首先,我们利用反向遗传技术将两株AIV的NS1(野生型称为NS1,缺失型称为NS1Δ)进行替换后拯救病毒,并感染A549/THP1细胞和BALB/c小鼠,结果表明NS1重组病毒抑制IFN产生的能力强于NS1Δ重组病毒.随后,利用生化实验和蛋白结构模拟实验进行分子机制研究,结果表明5个氨基酸缺失基序可通过两种途径影响IFN产生.(i)该5个氨基酸缺失导致NS1二聚体结构发生构象紊乱,导致NS1Δ结合双链RNA的能力下降,弱化对RIG-Ⅰ信号通路的抑制作用,导致宿主IFN诱生能力增强；(ii) E3泛素酶TRIM25是RIG-I分子活化的关键蛋白.NS1蛋白可以结合TRIM25分子的CCD区域,影响该抗病毒信号通路的活化.但5个氨基酸缺失减弱NS1Δ和TRIM25的相互作用以及对RIG-I信号通路活化的抑制作用,同样增强了宿主IFN的诱生能力.因此,本研究的结果表明：(i)高致病性禽流感病毒在与宿主进行相互作用的过程中,为了自己的生存,可以通过其编码蛋白NS1蛋白对其毒力进行微调,达到和宿主共生的平衡状态；(ii)本研究中鉴定的5个氨基酸缺失基序可以作为小分子药物设计的靶点,有助于流感病毒治疗或该病防控.
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