【摘 要】
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目的 利用TAT短肽的蛋白转导特性合成一种新型神经营养因子——融合蛋白TAT—BDNF.观察这种融合蛋白在大鼠神经系统的转导活性以及对急性脊髓损伤的神经保护作用.方法 原核表达的TAT—BDNF融合蛋白经纯化、复性,以2mg/kg的比例经尾静脉注射入正常大鼠体内,4h后取材、固定,通过对中枢神经系统的免疫组化以及Weston分析验证TAT—BDNF融合蛋白的体内转导活性.随后将TAT—BDNF融合
【机 构】
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南方医科大学南方医院脊柱骨病科 南方医科大学第三附属医院
【出 处】
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2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会
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目的 利用TAT短肽的蛋白转导特性合成一种新型神经营养因子——融合蛋白TAT—BDNF.观察这种融合蛋白在大鼠神经系统的转导活性以及对急性脊髓损伤的神经保护作用.方法 原核表达的TAT—BDNF融合蛋白经纯化、复性,以2mg/kg的比例经尾静脉注射入正常大鼠体内,4h后取材、固定,通过对中枢神经系统的免疫组化以及Weston分析验证TAT—BDNF融合蛋白的体内转导活性.随后将TAT—BDNF融合蛋白经尾静脉注射到急性脊髓损伤的大鼠体内.在损伤后3d通过脊髓组织切片TUNEL染色,观察细胞凋亡情况；在损伤后7d通过神经元尼氏染色观察脊髓损伤部位神经元的存活状态.并通过BBB评分对脊髓损伤后大鼠后肢运动功能进行评估.结果 静脉注射TAT—BDNF蛋白4h后SD大鼠的大脑及脊髓中的各层细胞内均能看到均匀分布的TAT—BDNF融合蛋白.
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