【摘 要】
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目的:构建携带胰岛素基因的逆转录病毒载体,使其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达.方法:通过RT-PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段,并将其连接入逆转录病毒载体pL
【机 构】
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江苏省南通大学附属医院普外科一区,江苏,南通,226001
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目的:构建携带胰岛素基因的逆转录病毒载体,使其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达.方法:通过RT-PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段,并将其连接入逆转录病毒载体pLNCX,经过包装细胞PT67的包装后,获得含外源性胰岛素基因的病毒颗粒并感染hMSCs,用RT-PCR法、免疫荧光法、放射免疫法、葡萄糖刺激试验分析胰岛基因的表达情况.结果:携带胰岛素基因的逆转录病毒载体构建成功,转导入hMSCs后能够稳定表达胰岛素基因,并分泌至细胞外持续3周以上,但对葡萄糖刺激无明显反应.结论:逆转录病毒载体能够将胰岛素基因导入hMSCs并稳定表达.
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