【摘 要】
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为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。 结果：使用L
【机 构】
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郑州大学生物工程系,河南 郑州 450001 河南省动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002
【出 处】
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第五届南京农业大学畜牧兽医学术年会----家禽高效养殖与重大疫病防控研讨会
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为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。
结果：使用LB培养基于37℃培养3．5 h后,采用终浓度为2 mmol／L的IPTG在28℃、200 r／min诱导培养5 h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a—NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应。说明NP蛋白得到正确表达。
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