【摘 要】
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目的:探讨癌基因Ras诱导小鼠肝组织中线粒体功能障碍及肝肿瘤细胞抗氧化应激的分子作用机制.
方法:采集H-ras12V转基因肝癌雄性小鼠的肝癌组织和癌旁组织及正常对照雄性
【机 构】
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大连医科大学实验动物中心116044
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目的:探讨癌基因Ras诱导小鼠肝组织中线粒体功能障碍及肝肿瘤细胞抗氧化应激的分子作用机制.
方法:采集H-ras12V转基因肝癌雄性小鼠的肝癌组织和癌旁组织及正常对照雄性小鼠的正常肝组织,比色法定量检测试剂盒检测组织中线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性;转录组测序和RFQ-PCR法检测组织中线粒体复合物关键酶及Bcl-2和Ucp2的mRNA表达水平;免疫荧光测定试剂盒检测组织中的ROS水平.
结果:与正常对照雄性小鼠肝组织相比,转基因雄性小鼠肝癌组织和癌旁组织的复合物Ⅰ活性均显著降低,F=14.26,P=0.003.呼吸链复合物Ⅰ/Ⅲ/Ⅳ关键酶的mRNA表达水平检测结果表明,与正常对照组相比,肝癌组织和癌旁组织的duf12、Ndufs6、Uqcrb、Cox7a2表达水平均显著降低,统计量分别为F=18.55,P=0.001;F=7.06,P=0.014;F=12.81,P=0.002;F=10.51,P=0.004.免疫荧光检测表明,与正常对照组和肝癌组织相比,癌旁组织中的ROS水平显著升高,F=31.35,P=0.001.与正常对照组和癌旁组织相比,肝癌组织中的Bcl-2和Ucp2表达水平均显著升高,统计量分别为F=20.29,P=0.002;F=15.51,P=0.001.
结论:Ras癌基因的表达直接下调了肝组织线粒体呼吸链复合物关键酶的表达,进而导致线粒体功能障碍并提升细胞内ROS水平.肝癌细胞通过促进Bcl-2和Ucp2的表达降低线粒体产生的ROS,进而促进肝癌的发生发展.
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