【摘 要】
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目的:研究高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)及G蛋白偶联受体177(Wls/GPR177)对人脑胶质瘤细胞增殖的影响及机制,为胶质瘤的基因治疗提供实验及理论依据.方法:(1)采用免疫印迹(WB)及免疫组织化学(IHC)技术检测GOLPH3和Wls在非肿瘤脑组织及脑胶质瘤组织中的表达情况.(2)运用亚克隆技术构建pEGFP-N1-Wls质粒;运用慢病毒相关技术构建稳定下调GOLPH3或Wls的U2
【机 构】
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徐州医学院附属医院脑科医院,221000
【出 处】
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江苏省第十八次神经外科学学术会议暨第一届苏、浙、闽神经外科高峰论坛
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目的:研究高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)及G蛋白偶联受体177(Wls/GPR177)对人脑胶质瘤细胞增殖的影响及机制,为胶质瘤的基因治疗提供实验及理论依据.方法:(1)采用免疫印迹(WB)及免疫组织化学(IHC)技术检测GOLPH3和Wls在非肿瘤脑组织及脑胶质瘤组织中的表达情况.(2)运用亚克隆技术构建pEGFP-N1-Wls质粒;运用慢病毒相关技术构建稳定下调GOLPH3或Wls的U251细胞及稳定过表达GOLPH3的U251细胞.(3)在体外培养的胶质瘤细胞(包括瞬时转染、稳定下调或过表达的细胞)中,应用RT-PCR检测核酸水平变化;应用WB和/或免疫荧光(IF)检测蛋白的表达水平与亚细胞定位情况;应用EdU实验检测细胞增殖情况;通过Co-IP及IF技术检测GOLPH3及Wls的共定位及定位变化情况.
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