【摘 要】
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研究背景:有机磷化合物能在人体和敏感动物中诱发迟发性神经病(OPIDN)。0PIDN的特点是接触有机磷化合物1-3周后出现症状。首发症状多为感觉异常,很快发展为运动性肌无力与共
【出 处】
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全国生化/工业与卫生毒理学学术会议
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研究背景:有机磷化合物能在人体和敏感动物中诱发迟发性神经病(OPIDN)。0PIDN的特点是接触有机磷化合物1-3周后出现症状。首发症状多为感觉异常,很快发展为运动性肌无力与共济失调,严重者可瘫痪.OPIDN在组织病理学上表现为脊髓和外周神经轴突的节间肿胀及Wallerian样变性,超微结构可见轴突Ranvier结形成充满神经丝(NF)的肿胀,以及线粒体、徽管等在轴浆内大量堆积。鉴于OPIDN在病理上表现为NF变性堆积的现象,我们推测NF等细胞骨架可能参与了OPIDN发生的病理生理过程.NFs属于Ⅳ型中间丝纤维,与徽管、微丝等骨架蛋白一起构成三维网状细胞骨架,支撑神经细胞的形态结构,维持其生理功能.目的:本研究利用三邻甲苯磷酸酯(TOCP)和苯甲基磺酰氟(PMSF)建立OPIDN模型和PMSF保护模型,检测神经组织中NFs含量、NFs降解的时间变化曲线,研究NFs变化与OPIDN的关系,以探索OPIDN发生的可能机制.方法: (1)动物模型建立:成年罗曼母鸡随机分为OPIDN模型组和PMSF保护组.皮下注射给予PMSF保护组动物60mg,kg的PMSF,24 h后,灌胃给予OPIDN模型组和PMSF保护组动物750mg/kg的TOCP,并分别在TOCP染毒后0、1、5、10、21天处死动物,取神经组织。(2)样品处理与检测:利用1％triton匀浆神经组织,100,000g离心分成上清和沉淀两种组分.沉淀中主要含有以细胞骨架形式存在的NFs,而上清中含有以单体或杂合四聚体形式存在的NFs.利用Western blotting检测3种NF亚单位(NF-H、NF-M、NF-L)的相对含量以及NF-L的降解变化.
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