【摘 要】
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为研究鼠伤寒沙门菌双组分信号系统的应答调节蛋白基因cpxR对菌株药物敏感性的影响.本研究以pKD4质粒为模板,PCR扩增其两侧与cpxR基因上下游同源且含有卡那霉素抗性基因
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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为研究鼠伤寒沙门菌双组分信号系统的应答调节蛋白基因cpxR对菌株药物敏感性的影响.本研究以pKD4质粒为模板,PCR扩增其两侧与cpxR基因上下游同源且含有卡那霉素抗性基因的线性打靶DNA片段,在pKD46质粒的辅助下进行Red同源重组,用线性打靶DNA片段替换鼠伤寒沙门菌CVCC541(JS)的cpxR基因,再利用pCP20质粒消除FRT位点间的卡那霉素抗性基因,构建基因缺失株JS△cpxR.此外,通过构建重组表达质粒pBAD-cpxR并将其转化入JS△cpxR中,制备回补菌株JS△cpxR/pcpxR.以微量稀释法测定12种代表性抗菌药物对JS、JS△cpxR和回补菌株JS△cpxR/pcpxR的最小抑菌浓度(MIC).结果显示,庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、头孢噻呋(CEF)和头孢曲松(CRO)对鼠伤寒沙门菌JS株的MIC值分别为JS△cpxR的4、4、4和2倍；而随诱导剂L广阿拉伯糖浓度的增高,这4种药物对回补菌株JS△cpxR/pcpxR的MIC值均逐渐恢复到原菌株JS的水平,呈剂量依赖性关系,而且高浓度诱导时4种药物对回补菌株的MIC分别为JS△cpxR的16、8、8和16倍,其他药物的MIC值未出现明显的变化.上述实验结果表明：cpxR能够调控鼠伤寒沙门菌对GEN、AMK、CRO和CEF的敏感性.
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