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外泌体是由细胞分泌的一种纳米级囊泡,通过结合在受体细胞表面或进入受体细胞,参与许多重要的生理、病理过程,但外泌体进入细胞的机制和作用还不是很清楚。本研究以PC12 细胞为模型,探讨外泌体进入细胞的机制及介导miRNA 传递影响受体细胞中的靶基因表达。首先,通过超速离心法获得PC12 细胞来源的外泌体,采用荧光染料标记外泌体,利用单细胞检测技术,通过药物抑制和siRNA 干扰等手段研究外泌体进入受体细胞的机制,并通过qRT-PCR 和Western blot 研究外泌体中高表达的miRNA 对受体细胞的影响。结果显示,外泌体经由网格蛋白介导的胞吞和大胞饮两种途径进入受体细胞。在摄入PC12 细胞来源的外泌体之后,骨髓间充质干细胞(BMSC)中的TGFβR Ⅱ和TPM1 等miR-21 靶基因的表达受到抑制。结果表明,PC12 细胞能够通过分泌的外泌体将miR-21转入受体细胞,并且影响受体细胞中相应靶基因的表达。