【摘 要】
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目的 研究CaLY55减毒疫苗对小鼠系统性白念珠菌感染模型的保护作用,并阐明其保护机制.方法 小鼠预先尾静脉注射CaLY55 2.5×106 cells,在免疫后第8、15、21、30天,分离小鼠血清并通过ELISA、免疫荧光(IFA)、中性粒细胞杀伤、CBA检测细胞因子等体外实验考察免疫血清体外抗白念珠菌作用.分离小鼠心、肝、脾、肺、肾制备匀浆,稀释不同倍数均匀涂于SDA平皿,计算脏器活菌落数目
【机 构】
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上海第二军医大学药学院新药研究中心
【出 处】
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全国首届真菌感染与宿主免疫学术研讨会
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目的 研究CaLY55减毒疫苗对小鼠系统性白念珠菌感染模型的保护作用,并阐明其保护机制.方法 小鼠预先尾静脉注射CaLY55 2.5×106 cells,在免疫后第8、15、21、30天,分离小鼠血清并通过ELISA、免疫荧光(IFA)、中性粒细胞杀伤、CBA检测细胞因子等体外实验考察免疫血清体外抗白念珠菌作用.分离小鼠心、肝、脾、肺、肾制备匀浆,稀释不同倍数均匀涂于SDA平皿,计算脏器活菌落数目(CFU)；用流式细胞术检测CaLY55免疫小鼠与对照组小鼠脾细胞CD4+、CD8+细胞的变化.其余免疫小鼠在不同时间点分别用致死剂量的白念珠菌标准株SC5314 1×106 cells攻击,观察接受攻击后小鼠40天存活率.结果小鼠尾静脉注射CaLY55 2.5×106 cells后30天生存率为100％.IFA实验发现免疫不同时间的抗血清均可与白念珠菌酵母态或菌丝结合；免疫之后的抗血清可增强体外中性粒细胞杀伤；免疫后小鼠血清TNF-α、IL-17、IL-12、IL-10与对照组相比显著升高；CFU实验表明CaLY55在小鼠心,肝,脾,肺,脑迅速富集并快速清除,肾脏则需要较长时间,而且富集量明显高于其它器官,说明CaLY55的靶器官主要是肾脏.免疫后小鼠脾细胞CD4+与阴性对照组分别为73.21％、27.70％； CD8+细胞则分别是50.93％、29.73％,并且CD4/CD8在免疫小鼠与对照组分别为1.44、0.93.预先用CaLY55免疫21天再用致死剂量标准株攻击后小鼠40天生存率是50％,而对照组全部死亡.结论 CaLY55减毒株主要富集在小鼠肾脏,预先注射减毒株可以保护侵袭性念珠菌感染的小鼠,其免疫保护机制涉及到体液免疫与细胞免疫.
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