【摘 要】
：
目的:通过分子克隆和原核表达获得人瘦素在大肠杆菌的高效表达,了解纯化的产品对胆固醇代谢的影响,提出瘦素为内源性降低动脉粥样硬化危险的活性因子的可能性.方法与结果:瘦素cDNA的获取:从天津市儿童医院急性肠梗阻手术患儿皮下脂肪组织中提取总RNA.设计上、下游引物,以该总RNA中的瘦素mRNA为模板,RT-PCR后获瘦素cDNA.将其连接于原核表达载体pBV220上.对目的基因进行自动测序,结果表明,
【机 构】
：
卫生学环境医学研究所,天津,300050 山东省临沂市卫生学校,临沂,276030
论文部分内容阅读
目的:通过分子克隆和原核表达获得人瘦素在大肠杆菌的高效表达,了解纯化的产品对胆固醇代谢的影响,提出瘦素为内源性降低动脉粥样硬化危险的活性因子的可能性.
方法与结果:瘦素cDNA的获取:从天津市儿童医院急性肠梗阻手术患儿皮下脂肪组织中提取总RNA.设计上、下游引物,以该总RNA中的瘦素mRNA为模板,RT-PCR后获瘦素cDNA.将其连接于原核表达载体pBV220上.对目的基因进行自动测序,结果表明,本研究获得的瘦素cDNA缺失第二个外显子的前三个碱基CAG,即由该cDNA编码的成熟肽少第28位谷氨酰胺残基.瘦素的原核表达:将该重组质粒转化大肠杆菌,诱导获得瘦素的稳定、高效表达.瘦素的表达量约占细菌总蛋白的40％.表达的瘦素以包涵体形式存在.瘦素的纯化:包涵体以4.6M尿素溶解后,通过逐步降低变性剂浓度,缓慢复性.离心弃沉淀,上清则经过Sephacryl S-200柱层析,获得初步纯化的重组瘦素.重组瘦素的活性:整体实验表明,每只正常小鼠每日腹腔注射20ug瘦素,小鼠体重第1天即降低,第2和3天继续降低,第4天则开始稍升高.小鼠饲料摄入量与体重的变化趋势相一致.这一结果表明,瘦素可能存在多肽性.缺失第28位谷氨酰胺残基的重组瘦素也一样具有减少小鼠饲料摄入量、降低体重的活性.重组瘦素降低胆固醇的作用:纯化获得的重组瘦素可降低摄食高胆固醇小鼠血浆总胆固醇和LDL-胆固醇的作用.
结论:瘦素存在多肽性,缺失第28位谷氨酰胺残基的重组瘦素具有减少小鼠饲料摄入量、降低体重的活性.并可降低摄食高胆固醇小鼠血浆总胆固醇和LDL-胆固醇的作用.推测它可能为降低动脉粥样硬化危险的内源性活性因子.
其他文献
本文对农村婴幼儿辅食添加进行了研究，结果表明，不同的传播方式，健康教育效果明显不同，综合干预实验乡镇传播干预知识点整体接受率均达到85％，对照组为60％，目标人群比较喜欢的传播途径是村医和电视。综合干预乡镇目标人群相关行为形成率提高较大，单纯大众传播乡镇目标人群相关行为形成率提高较小，个别行为基本没有变化。“以村为干预单位，以乡村医生为骨干，以妇女干部为依托，以奖惩为保证措施，强化健康教育管理”的
目的：探讨社区成年人营养教育的效果。方法：在安阳市安钢社区进行营养教育活动，并在教育前后分别随机抽取2400人调查营养知识和膳食行为，进行膳食调查，了解食物食用量和频率。结果：营养、膳食的基本知识明显提高(P<0.001)；奶与奶制品，鱼虾类食物的食用量和频率增加(P<0.05)，肥肉的食用量降低(P<0.05)，不良膳食行为有改变的趋势。结论：社区成年人营养教育效果明显。
目的：北京市铁营养知识水平和补铁态度及其相关因素的调查分析。方法：在北京市区的公共汽车站采用拦截访问调查法，了解被调查者的铁营养知识和补铁态度及与其相关的影响因素。结果：北京市城区居民对铁元素和铁缺乏的危害有一定的了解，60％以上的人对于补铁和铁强化食品持有积极的态度，但只有20％～30％的人了解饮食补铁的主要知识。教育程度是铁营养知识水平的相关因素，这主要表现在一般性的铁营养知识方面。结论：本次
本文介绍了一个被称为“给我五份”的干预项目，该项目应用社会学习理论或社会认知理论进行营养干预，以期增加美国4～5年级的小学生的蔬菜和水果的摄入量。
心身疾病是以躯体疾患为基础，在其发生、发展、转归和防治过程中，心理因素以及性格缺陷都发生重要影响的一类疾病。本文介绍了有关膳食营养成分改善心理异常以及预防心身疾病的研究进展，说明在研究营养因素预防器质性疾病的同时，应当重视研究心理和行为的营养调控过程，探讨膳食营养因素在维护精神健康方面的作用。
研究糖耐量低减(IGT)病人转归因素对糖尿病防治有重要意义.用糖耐量试验(OGTT)确诊IGT181例,根据饮食教育一年后,病人餐后2小时血糖分成转正常组(NGT),维持糖耐量低减组(IGT),糖尿病组(DM).结果表明,NGT组在一年前开始观察时,体重69.0kg,DM组体重72.9kg(P＜0.05),当BMI＜25时,转为DM人数占DM组的27.7％,BMI≥25时,转为DM人数占DM组的7
目的:葡萄糖耐量异常(IGT)是糖尿病的前期,是最重要的糖尿病高危人群.有效地干预治疗IGT病人,可在很大程度上防止恶化成糖尿病.为了评价改变生活方式(饮食控制和增加体力活动)对IGT病人的治疗作用,我们对饮食指导和锻炼干预前后的变化作了细致的观察.方法:对112名40岁以上可疑患者进行葡萄糖耐量测定,清晨空腹抽静脉血后口服葡萄糖75克,两小时后再次抽静脉血,2小时血糖介于7.8mmol/L～11
采用生长期Wistar大鼠建立缺锌模型,采用避暗法观察了缺锌对大鼠记忆能力的影响,并分别以气相色谱法、荧光分析法、碱性羟胺法、NO还原法、放射免疫法和放射受体法测定了实验各组大鼠脑组织中游离脂肪酸、5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱、一氧化氮(NO)合酶活性、生长抑素和N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA-R)的含量.结果:缺锌明显降低大鼠记忆能力,同时使大鼠脑组织乙酰胆碱、NO合酶活性、生长抑素
目的:探讨双歧因子对人体血糖/血脂的调节功效.方法:选择临床确诊的轻型Ⅱ型糖尿病患者48例和高血脂患者52例,分别随机分为试验组和对照组,试验组患者于早晨空腹服用由新疆纵横股份有限公司提供的异麦芽低聚糖(又叫双歧因子)15g,连续服用2周,于试验前后分别测定空腹血糖、餐后2小时血糖(用电化感应式血糖仪测定)和血总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL)(用氧化酶法测定),低密度脂蛋
用40mg/kg的CrCl3溶液一次性浸泡绿豆24小时,在25℃发芽5天获得富铬豆芽,60℃干燥至水分含量低于11％,粉碎得富铬豆芽粉样品,总铬含量为72.6mg/kg,铬有机化程度达95％左右.小鼠经口LD50＞10000mgg/g.bw,属无毒级,骨髓微核、精子畸形试验表明无突变效应.给四氧嘧啶高血糖模型小鼠三个剂量的富铬豆芽粉(按富铬豆芽粉总铬含量计):低剂量组8.3μg/kg.d、中剂量组