大鼠脑组织脉络丛尿素通道蛋白B在高盐饮食导致大鼠高血压中的作用

来源 :2017第十九届中国科协年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hjkl123lkjh
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  目的 探讨尿素通道蛋白B在大鼠脑组织脉络丛的表达,揭示尿素通道蛋白B在高盐导致大鼠高血压过程中的作用.方法 利用9w龄盐敏感性高血压(Dahl S)和盐抵抗性高血压(Dahl R)雄性大鼠为实验动物,给予普通饮食(0.3%Nacl)或高盐饮食(8%Nacl)2w,随机分为四组,Dahl S大鼠给予普通饮食组,Dahl S高盐饮食组,Dahl R大鼠给予普通饮食组,Dahl R高盐饮食组;(1)免疫荧光化学方法和Western Blot方法检测尿素通道蛋白B在大鼠脑组织的表达与定位;(2)对比检测Dahl S大鼠和Dahl R大鼠给予高盐饮食后脑组织脉络丛尿素通道蛋白B的mRNA和蛋白表达变化情况、脑脊液和血浆钠和钾离子浓度的变化情况;血压和心率变化情况.(3)利用shRNA方法降低SD大鼠脑组织脉络丛尿素通道蛋白B的表达,再给予高盐饮食2w,检测脑脊液和血浆钠和钾离子浓度的变化情况;血压和心率变化情况.结果 (1)免疫荧光化学方法显示尿素通道蛋白B表达于大鼠脑组织脉络丛上皮细胞膜;(2)Real-time PCR方法和Western Blot方法结果显示高盐饮食2w导致Dahl S大鼠脑组织脉络丛尿素通道蛋白B的mRNA和蛋白表达下调;Dahl S大鼠在给予高盐饮食2w后,脑脊液钠离子浓度明显升高(P<0.05),Dahl R大鼠在给予高盐饮食2w后脑脊液钠离子浓度无明显变化;血浆钾离子浓度无明显变化;DahlS大鼠在给予高盐饮食2w后,平均动脉压和心率明显升高(P<0.05);其中平均动脉压(MAP)升高了38±4mmHg(n=8),心率增加了49±3bpm(n=8);Dahl R大鼠组,高盐饮食2w后平均动脉压(MAP)仅升高了8±3mmHg(n=8);(3)利用shRNA方法选择性下调SD大鼠脑组织脉络丛UTB表达水平,结果显示:侧脑室注射Lv-UTB-shRNA质粒后,大鼠脑组织脉络丛UTB mRNA表达水平从第2d开始明显下降(P<0.05),第4天下降幅度最大(P<0.05),UTB mRNA表达水平下降一直持续到第18d;SD大鼠侧脑室微量注射Lv-UTB-shRNA质粒(1×109 gc in 100μl)8d下调大鼠脑组织脉络丛UTB蛋白表达水平,再给予大鼠高盐饮食2w,结果显示:大鼠平均动脉压升高到126±2mmHg(侧脑室注射Lv-UTB-shRNA质粒前为97±7mmHg,n=8,P<0.05);侧脑室注射Lv-UTB-shRNA再给予高盐饮食导致大鼠脑脊液钠离子浓度显著升高到154.2±1.3mM(n=8,P<0.05,给予高盐饮食前脑脊液钠离子浓度为,146.9±1.4mM).以上结果显示Dahl S大鼠给予高盐饮食会导致脑组织脉络丛尿素通道蛋白B表达下调、脑脊液钠离子浓度升高、大鼠平均动脉压和心率显著升高; Dahl R大鼠在选择性下调脑组织脉络丛UTB表达水平后,给予高盐饮食,会导致大鼠脑脊液钠离子浓度升高、大鼠平均动脉压和心率显著升高.结论 尿素通道蛋白B表达于大鼠脑组织脉络丛上皮细胞膜;下调大鼠脑组织脉络丛尿素通道蛋白B表达水平再给予高盐饮食,导致大鼠脑脊液钠离子浓度升高进而引起血压升高,提示尿素通道蛋白B参与了大鼠盐敏感性高血压的发生和发展过程.
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