【摘 要】
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目的：针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂,富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点,选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法.方法：用4种不同的RNA
【机 构】
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淮北煤炭师范学院生物系,安徽 淮北 235000
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目的：针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂,富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点,选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法.方法：用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂土法、CTAB-LiCl法和改进的SDS/酚法提取总RNA,通过电泳、紫外分光光度计检测以及RT-PCR验证等对提取结果进行分析比较.结果：4种方法均能从半夏成熟叶片中提取到总RNA.其中皂土法的提取过程只需3-4h,是其他3种提取方法所用时间的一半.提取1g叶片的成本只有其他3种方法的1/13-1/14.此法提取的总RNA 18S、28S带型清晰无弥散,完整性好,无严重的蛋白质和其他杂质污染,A 260/A280为1.8-2.0,A260/A230大于2.0,且总RNA的产率高,为365.744μg/g鲜重,提取的总RNA适用于RT-PCR试验.结论：皂土法提取的RNA完全适用于DDRT-PCR,Northern blotting、eDNA文库构建等分子生物学研究,是一种快速、经济,适于抽提半夏总RNA的好方法.
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