【摘 要】
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随着微生物次级代谢产物生物合成机制的不断深入研究,大量代谢产物合成基因簇被克隆分析,为从微生物中定向寻找次级代谢产物提供了一条新的筛选途径.采用特异性引物和PCR技术
【机 构】
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福建省微生物研究所, 福建省新药(微生物)筛选重点实验室, 福州 350007
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随着微生物次级代谢产物生物合成机制的不断深入研究,大量代谢产物合成基因簇被克隆分析,为从微生物中定向寻找次级代谢产物提供了一条新的筛选途径.采用特异性引物和PCR技术从大量微生物中快速确定具有潜在合成某类化学结构次级代谢产物的菌株,结合发酵营养学研究挖掘微生物强大的次级代谢产物合成能力,可望克服传统活性筛选存在的不足.本文针对催化多环芳香类代谢产物生物合成的II型PKS基因,选择KSα基因的保守区域设计兼并引物,通过PCR扩增筛选和扩增产物同源分析,从微生物资源库中筛选到一株携带KSα基因的海洋来源放线菌FIM02-765,形态学和生理生化特征研究以及16SrRNA基因序列分析表明该菌株属放线菌目链孢囊菌科野野村氏菌属(Nonomuraea),与该属同源性相近典型菌株的分类比较发现FIM02-765可能是该属的一个新种.同时,深入的发酵营养学与代谢产物差异性研究发现,该菌株在以甘露醇为碳源的发酵培养基中产生一种具有特异性紫外吸收光谱的次级代谢产物,从放大发酵培养物中分离得到化合物FW02765,理化性质和波谱学研究表明该化合物与Lee等人报道从马杜拉放线菌中发现的多环芳香类化合物Simaomicinα同质.生物学活性研究表明该化合物具有很强的抗菌和抗肿瘤活性.本文首次从海洋稀有放线菌野野村氏菌(Nonomuraea sp.)中分离得到多环氧杂蒽酮类代谢产物Simaomicinα.同时证实基因筛选策略是微生物代谢产物定向发现的有效手段之一,特别对从微生物中发现那些表达要求高、产量低的次级代谢产物具有一定的优势,克服传统活性筛选的不足.
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