【摘 要】
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目的：探讨脊柱结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL、gidB、rrs的突变及其新的耐药机制.为下一步深入探索脊柱结核新的耐药机制研究提供基础,为抗脊柱结核药物的研发提供科学的理论和实验依据,提出新的治疗策略和思路.为最终遏制脊柱结核及肺结核在世界的传播及恶化揭开序幕.材料与方法：选取2012年11月至2014年12月在我院收治的19例脊柱结核患者.1.BACTECTMMGITTM960全自动分枝杆
【出 处】
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中华医学会第十七届骨科学术会议暨第十届COA国际学术大会
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目的：探讨脊柱结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL、gidB、rrs的突变及其新的耐药机制.为下一步深入探索脊柱结核新的耐药机制研究提供基础,为抗脊柱结核药物的研发提供科学的理论和实验依据,提出新的治疗策略和思路.为最终遏制脊柱结核及肺结核在世界的传播及恶化揭开序幕.材料与方法：选取2012年11月至2014年12月在我院收治的19例脊柱结核患者.1.BACTECTMMGITTM960全自动分枝杆菌快速培养仪进行结核菌培养及绝对浓度法药敏试验；培养出阳性结果后进行绝对浓度法药敏试验,同时进行传统菌种鉴定.2.目的基因提取(rpsL、gidB、rrs)、电泳检测及DNA测序：培养所获得菌落经常规前处理后,经基因组提取、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳、分离获得目的DNA、最后进行DNA测序.将测序所得结果与H37RvDNA(来自Genebank)做对比研究.分析基因突变位点与耐药的相关性.结果：1.BACTECTMMGITTM960全自动分枝杆菌快速培养仪培养及绝对浓度法药物敏感试验：1.1BACTECTMMGITTM960全自动分枝杆菌快速培养仪培养结果：共培养标本19例,培养阳性16例,阴性3例.阳性率为84.2％.1.2绝对浓度法药敏试验结果共16例阳性菌株进行药敏试验,存在耐药的有3例,耐药率为18.7％(316).1.3菌种鉴定结果共16例标本培养结果为阳性,做菌种鉴定.鉴定结果：16例均鉴定为MTB,且均为人型.2.基因芯片菌种鉴定及DNA测序2.1基因芯片分枝杆菌菌种鉴定结果BACTECTMMGITTM960全自动分枝杆菌快速培养仪培养的16例阳性菌株均进行基因芯片菌种鉴定,鉴定结果均为人型,BACTECTMMGITTM960系统培养结果与基因芯片菌种鉴定的结果全数符合；2.2DNA测序结果A、B、C耐药菌株在gidB基因测序中,均发现了新突变位点.结论：1、本实验在脊柱结核杆菌链霉素耐药株gidB基因中发现了新的突变位点：C102T、T615C、224移码(670C缺失).2、初步得出在rrs、rpsL基因未发生突变及gidB基因C102T、T615C均为同义突变的情况下,T276G、G299A双位点的突变可能导致脊柱结核杆菌SM高耐药水平,而224移码(670C缺失)也可能为其中原因之一.
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