快速检测牛产肠毒素大肠杆菌的多重PCR方法的研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q157194179
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,EscherichiaColi,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一种ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素(ST和LT)的基因序列,设计两对聚合酶链式反应(PCR)引物,建立多重PCR方法.该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感毒高、特异性强和检测速度快等特点.本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用.采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻试样进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105个,ST阳性为126个,LT+ST阳性的为96个,阳性率为66.5﹪.而采用直接从粪便中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪便为ETEC阳性,其中LT阳性为112个,ST阳性为137个,LT+ST阳性为103个,阳性率为71.9﹪,明显高于传统的检测方法。
其他文献
本文对哨兵动物及其在动物疫病防控中的应用进行了研究。文章指出,哨兵动物能及时侦查出病原体对人的威胁,及时预警有可能威胁人体的疫情,警告人类采取必要的防范措施。
本文对金黄色葡萄球菌毒力调控因子及其结构与功能进行了研究。文章围绕金黄色葡萄球菌的毒力调控位点和TCRS和SarA蛋白家族的结构与功能进行了论述。
本文对狂犬病流行现状与预防新技术进行了研究。文章围绕疫情概况、狂犬病临床症状的新动向、狂犬病预防新技术、疫情处理进行了论述。
利用荧光抗体技术检测病猪的内脏器官可能存在的猪瘟病毒,对猪瘟的早期诊断具有十分重要意义,猪瘟的常规诊断需要4-5天,而该项技术可在半天之内作出判断,既快速又客观、准确,在规模化猪场临床上可得到很多广泛应用.
根据伪狂犬病病毒(PRV)9B基因的序列,设计并合成了一对引物,以闽A株细胞培养毒为模板,筛选最佳反应条件,建立了检测PRV的PCR方法,应用本方法对分离的病毒进行基因扩增,获得了分子量为217bp的特异性DNA片段,证明了对分离病毒检测的特异性和敏感性,为伪狂犬病的快速诊断提供了条件.
由于母猪猪瘟免疫剂量不足,抗体水平低下,怀孕母猪感染猪瘟病毒,部分母猪引起流产、死胎,大部分怀孕母猪产下的仔猪发生先天性振颤,即抖抖病,通过病理解剖观察,肾脏点状出血,发病仔猪荧光抗体染色阳性,母猪发病期猪瘟抗体平均为5.1(1:36),紧急免疫后40天母猪抗体水平平均达11(1:2048)以上,紧急免疫后一周,病情得到控制,确诊为猪瘟引起的仔猪先天性震颤.
用副猪嗜血杆菌分离株感染断奶仔猪,发病仔猪临床表现为体温中度升高、精神不振、被毛粗乱、站立不稳、厌食、呼吸困难,尸体剖解可见胸腹腔纤维素渗出严重、有大量的渗出液、肺出血及脑充血等,病理组织学表现为肺脏、心脏、脾脏等脏器含有大量的嗜中性细胞的纤维蛋白性多发性浆膜炎、脑膜炎及支气管肺炎,表明此分离株为一高致病潜力的菌株.
本文对17个疑似PPE猪群中劳森氏胞内菌的检测进行了介绍。文章围绕疑似PPE猪群的选择、检测样品的采集、检测方法、检测结果等进行了论述。
本研究采用细菌分离培养,结合PCR方法,对2003年11月份~2005年4月份送检的159个患病猪场仔猪肺脏进行了副猪嗜血杆菌检测,结果为该菌阳性猪场次76个,占48﹪,该病发生与季节、猪的日龄和地区有关.本研究表明,副猪嗜血杆菌已在我国不同地区广泛流行.
猪传染性胸膜肺炎是严重危害我国规模化养猪业的呼吸道疾病之一,本文从该病的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防制等方面进行了简要综述.