【摘 要】
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对虾白斑综合征病毒(wssv)是养殖对虾主要病原,研究证明VP136C是WSSV的核衣壳蛋白。根据GeneBank上WSSV核衣壳蛋白基因vp136C的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到vp136C基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-vp136C并转化至大肠杆菌Top10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Western-blot和SDS-PAGE检测显示有与预期大小
【机 构】
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上海海洋大学,上海 201306;农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室;中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071
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对虾白斑综合征病毒(wssv)是养殖对虾主要病原,研究证明VP136C是WSSV的核衣壳蛋白。根据GeneBank上WSSV核衣壳蛋白基因vp136C的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到vp136C基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-vp136C并转化至大肠杆菌Top10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Western-blot和SDS-PAGE检测显示有与预期大小45kDa相符合的目的蛋白。以C02+亲和层析方法,获得纯化VP136C蛋白。采用Far-western blot结合ELISA方法,分析VP136C与WSSV结构蛋白的作用,结果表明,VPI36C与WSSV的囊膜蛋白VP26具有相互作用。该研究对于揭示WSSV分子组装机制,阐明WSSV致病机理具有重要意义。
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