【摘 要】
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[目的] 临床应用的猪支原体肺炎疫苗免疫保护效果较差.本研究目的是为猪支原体肺炎基因工程亚单位疫苗的研发提供候选抗原蛋白.[方法] 通过生物信息学方法预测Mhp144、Mh
【机 构】
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西南大学动物科技学院动物传染病学实验室,重庆 北碚 400715
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[目的] 临床应用的猪支原体肺炎疫苗免疫保护效果较差.本研究目的是为猪支原体肺炎基因工程亚单位疫苗的研发提供候选抗原蛋白.[方法] 通过生物信息学方法预测Mhp144、Mhp228、Mhp265、Mhp274 蛋白的亚细胞定位.合成mhp144、mhp228、mhp265、mhp274 基因,在合成过程中将编码色氨酸的密码子TGA 突变为TGG,合成的基因连接pGEX-6P-1 载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG 诱导目的蛋白表达.利用谷胱甘肽磁珠和PsP 酶纯化目的蛋白.[结果] 生物信息学预测表明Mhp144、Mhp228、Mhp265、Mhp274 蛋白存在于细胞外膜.这些蛋白均能以具有良好天然构象的可溶形式在大肠杆菌BL21(DE3)与GST 蛋白融合表达,且能被PsP 酶酶切,表达的蛋白分子量分别为40 kDa、21 kDa、42 kDa 和51 kDa.[结论] 为猪肺炎支原体基因工程疫苗的研发提供了研究材料.
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